肺癌相关蛋白OLC1在非小细胞肺癌患者外周血血浆中的水平及其临床意义

【摘要】研究背景：肺癌已经成为世界上严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均列各种恶性肿瘤之首。根据国家癌症中心及卫生计生委2010年登记的数据,肺癌已成为我国第一大癌症。目前,所有肺癌患者总的5年生存率仅为10-16%,而临床发现IA期肺癌患者的5年生存率可高达70%以上。因此,研究肺癌的生物学特性,期望找到能够早期发现肺癌的方法显得尤为重要,而血清学肿瘤标志物检测由于操作简便、无创等优势是近年来研究的热点。本实验室在前期的工作中建立了分析肺癌组织释放到体液中的游离蛋白的新模型,建立了包含1200多种蛋白的肺癌相关蛋白数据库,为肺癌肿瘤标志物的寻找提供了新的线索。本研究通过检测肺癌相关蛋白OLC1(Overexpressedinlungcancer1)在外周血血浆中的水平,评价其对于非小细胞肺癌(Nonsmallcelllungcancer,NSCLC)诊断的临床意义。材料和方法：1、取5-6周龄BALB/c小鼠,OLC1全长蛋白作为抗原免疫制备OLC1抗体。每只小鼠免疫4次,间隔2周免疫一次,每次15-30g抗原蛋白。通过Westernblot的方法筛选抗体,制备检测血浆中OLC1蛋白的双抗体夹心法ELISA试剂盒。2、利用ELISA试剂盒,检测281例非小细胞肺癌、54例肺良性疾病患者和92例健康对照个体(性别年龄匹配)的血浆中OLC1蛋白水平。3、利用ROC曲线下面积(Areaunderthereceiveroperatingcharacteristiccurve,AUC)评估OLC1对NSCLC的诊断效能。实验结果：共制备了11株特异性好的OLC1单克隆抗体,并成功建立了检测血浆OLC1的ELISA试剂盒,ELISA检测范围1.95-62.50ng/ml。检测结果显示：1、在NSCLC患者血浆中,OLC1的蛋白水平(mean±SD,186.4±174.1ng/ml)显著高于健康人群(mean±SD,109.1±100.0ng/ml,P<.0.001)。OLC1区分NSCLC和健康人群的ROC曲线下面积为0.69(95CI:0.62-0.76),当OLC1的cutoff值为67.72ng/ml时,敏感性84.34%,特异性51.09%。区分早期肺癌(IA,46例)和健康人群的ROC曲线下面积为0.68(95CI:0.6-0.77),敏感性77.78%,特异性54.35%。2、NSCLC患者血浆中OLC1蛋白水平(mean±SD,186.4±174.1ng/ml)与肺良性疾病患者血浆中OLC1水平((?)mean±SD,186.4±222.8ng/ml)相比没有明显升高(P>0.05),但肺良性疾病患者血浆中OLC1水平(mean±SD,186.4±222.8ng/ml)高于健康人群(mean±SD,109.1±100.0ng/ml。3、NSCLC患者中吸烟者血浆OLC1水平(mean±SD,182.0±146.6ng/ml)与非吸烟者OLC1水平(mean±SD,191.2±195.6ng/ml)比较无明显升高(P>0.05)。结论：1、在NSCLC患者血浆中OLC1的蛋白水平显著升高,可以成为NSCLC辅助临床诊断的候选标志物。2、NSCLC患者外周血中OLC1浓度与肺癌的病理类型、肿瘤分期、分化等临床因素无关,肿瘤直径>3cm的肺癌患者血浆中OLC1的蛋白水平略高于≤3cm的患者,但无统计学差异。3、NSCLC患者外周血OLC1水平与吸烟无明显相关性。4、肺良性疾病患者血浆OLC1水平明显升高。
【作者】杨龙海；
【导师】孙克林；
【作者基本信息】北京协和医学院，肿瘤学，2014，博士
【关键词】OLC1；单克隆抗体；ELISA；早期诊断；非小细胞肺癌；

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